什么是流式细胞术?
流式细胞术 激光器 不同类型的细胞及其他生物颗粒激光器 计数或分选。当您从医生那里拿到血常规检查结果时,其分析正是通过流式细胞术完成的。该技术还广泛应用于科研、制药领域,甚至在畜牧业中也有应用。
流式细胞术
流式细胞术 是一种广泛应用的方法,用于根据可通过光学手段测量的特性,对细胞、精子及其他微小生物体进行无损分析(计数)和/或分选。该方法通常采用一种称为流体动力聚焦的流体技术,迫使细胞单列通过流池。
在所谓的相互作用区,细胞随后会受到一束或多束聚焦激光束的照射。(见下图。)由此产生的散射光和(斯托克斯位移的)荧光被光学元件 收集光学元件 滤光片 分离滤光片 离散的波长带光学元件 随后,使用光电探测器测量每个波长带的光强度。
流式细胞术 如何流式细胞术 细胞
在科研 临床实验室的血细胞分析应用中,首先会对细胞进行多种荧光标记(荧光染料)处理。这些标记物是通过抗体生物化学技术制备的,因此只能与细胞表面的特定抗原(通常是蛋白质)结合。在某些应用中,细胞内的物质(如DNA)也可能通过某种方式进行荧光标记。
当每个标记细胞通过相互作用区时,可通过分析各波长带的相对强度,结合多变量参数分析,根据不同参数来统计细胞群的数量。此外,还可以测量关键角度(前向散射和侧向散射)的光散射情况,从而确定细胞的形状。
多参数流式细胞术
流式细胞术 多参数流式细胞术 一词流式细胞术 能够检测数十种不同细胞参数的计数分析仪器及相关操作规程。这需要使用多种激光波长。
传统的流式细胞仪通常使用相同的四种激光波长:405 nm、488 nm 和 640 nm,并可选配 561 nm。但一些更复杂的多参数仪器可能使用多达 10 种不同的激光器。这些仪器越来越多地包含一种或多种紫外波长,以将仪器带宽扩展到可见光谱之外,从而增加参数的总数。 其中部分仪器还可集成超过100个独立光电探测器。
多波长激光引擎
传统和多参数流式细胞仪的制造商越来越依赖多波长激光引擎 多个激光器、聚焦光学元件和控制电子元件集成在一个紧凑的密封封装中。这简化了仪器的组装和对准工作,并提高了其可靠性及延长了维护间隔时间。
流式细胞分选仪(FACS)
在某些科研 例如肿瘤学、免疫学和药物研发,流式细胞术 细胞分选,即有选择性地收集目标类型的细胞,同时剔除所有其他细胞。在荧光激活细胞分选仪(FACS)中,流体在进入相互作用区之前会流经一个喷嘴,该喷嘴确保每个细胞都被单独包裹在微小的液滴中,这些液滴会从喷嘴处获得微小的静电荷。 随后,静电板电极被激活,根据仪器计算机记录的细胞类型,产生电场将带电液滴偏转至收集管中。
图2: 利用流式细胞术进行细胞分选。通过静电偏转,根据细胞、精子或其他目标物的荧光和/或散射特征,将其导向特定区域进行收集。
流式细胞术 畜牧业和水产养殖。在畜牧业中,牛的精子会进行性别分选:对于奶牛,通常优先选择雌性精子;对于肉牛,则优先选择雄性精子。在此过程中,性别“不符”的精子会被激光束摧毁。在转基因鱼养殖中,会对鱼卵进行分选,以确保仅培育出不育的成鱼,从而消除逃逸鱼类污染本地鱼类基因库的风险。
流式细胞术:优化细胞检测流程
流式细胞术 每天被用于常规血液检测、科研和畜牧业。流式细胞术 激光器 荧光技术的应用流式细胞术 医生和科学家分析细胞的方式。流式细胞术出现之前,科学家和医生只能依靠显微镜和各种化学检测方法。 细胞计数通常需要人工完成,这是一个繁琐、耗时且容易出错的过程。流式细胞术 细胞检测流式细胞术 ,使医生和科学家能够在更短的时间内进行更多检测并收集更多数据。